上海莲霄生物产品：人凝血因子Ⅰ(FⅠ)ELISA试剂盒是一个夹心酶免疫分析法体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关生物液体样本中的浓度

一、人凝血因子Ⅰ(FⅠ)ELISA试剂盒实验前准备

1. 试剂与材料

• 试剂盒（含标准品、检测抗体、酶标板、底物A/B、终止液、洗涤液、封板膜等）。

• 样本（血清、血浆、组织匀浆液等）。

• 37℃恒温箱、离心机、移液器、洗板机（或手动洗板）、酶标仪（450nm波长）。

2. 样本处理

• 血清/血浆：离心分离（3000×g，10分钟），取上清液。

• 组织匀浆：匀浆后离心（5000×g，10分钟），取上清。

• 样本需避免反复冻融，4℃短期保存或-80℃长期保存。

二、人凝血因子Ⅰ(FⅠ)ELISA试剂盒操作步骤

1. 标准品配制

• 将标准品冻干粉用稀释液复溶，按说明书梯度稀释。

2. 加样

• 每孔加入100 μL样本或标准品，设空白孔。

• 覆盖封板膜，37℃孵育90分钟。

3. 洗涤

• 弃去孔内液体，每孔加350 μL洗涤液，静置30秒后弃去，重复3次。拍干残留液体。

4. 检测抗体孵育

• 每孔加入100 μL生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟。

• 洗涤3次（同步骤3）。

5. 显色反应

• 每孔加入100 μL酶结合物（HRP标记），37℃避光孵育30分钟。

• 洗涤5次（chedi去除洗涤液）。

6. 终止反应与读数

• 每孔加50 μL终止液，15分钟内用酶标仪在450nm波长测定OD值。

三、结果计算

1. 绘制标准曲线

• 以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，拟合标准曲线（常用Logistic四参数模型）。

2. 样本浓度计算

• 根据样本OD值代入标准曲线公式，计算LPA浓度。

四、注意事项

1. 严格避免交叉污染，加样时更换枪头。

2. 洗涤步骤需chedi，避免残留影响信号。

3. 标准品和试剂需恢复至室温后再使用。

4. 终止液具有腐蚀性，操作时需戴手套。

5. 若OD值超出标准曲线范围，需调整样本稀释比例。