植物原花青素（OPC）含量检测试剂盒说明书

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

货号：UPLC-W-A508 

规格：100T/48S

产品内容：

提取液：60%乙醇，自备，4℃保存。

试剂一：11%盐酸 8mL，自备,4℃保存。即 2.4mL 盐酸溶于 5.6mL 蒸馏水试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加 8mL 提取液溶解。

工作液：临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合。标准品：粉剂×1 支， 10mg 原花青素。

产品说明：

原花色素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物， 广泛存在于植物的各种器官中，具有ji qiang的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。

在酸性条件下，植物原花青素 A 环上的间苯二酚和jian ben san fen与香草醛发生缩合反应，产生有色化合物，在 500nm 处有特征吸收峰，测定 500nm 光吸收值，可计算植物中原花青素的含量。

自备实验用品及仪器：

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水、11%盐酸和

60%乙醇。

操作步骤：

一、OPC 提取:

将样本烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛之后，称取约 0.1g，加入 1mL 提取液，用超声提取法进行提取，超声功率 300W，破碎 5s，间歇 8s，提取，30min， 12000rpm，25℃，离心 10min，取上清，用提取液定容至 1mL，待测。

二、测定操作表:

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 500nm，蒸馏水调零。

2、 用提取液将原花青素配制成 10mg/mL 标准液，用提取液梯度稀释为 5、2.5、1.25、0.625、0.3125、

0.156、0.078、0.039、0.02、0.01mg/mL 的标准溶液。

3、 操作表

三、OPC 计算公式:

1、 标准曲线的绘制

以∆A 标准为 y 轴，标准溶液浓度为 x 轴，绘制标准曲线，得到方程 y=kx+b。2、 OPC 的计算

将∆A 测定带入方程，得到 x（mg/mL）

（1） 按样本鲜重计算

OPC 含量（mg/g 鲜重）= x×V 提取÷W=x÷W。

（2） 按样本蛋白浓度计算

OPC 含量（mg/mg prot）= x×V 提取÷（Cpr×V 提取）= x÷Cpr

V 提取：加入提取液体积，1 mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g。

注意事项：

1、配制好的试剂二应尽快使用，4℃保存时间不超过一个月。

2、吸光度变化应该控制在 0.006-1.2 之间。否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。